목차
譯者序文 ... ⅰ
原著者序文 ... ⅲ
執筆者一覽 ... ⅳ
제1장 장비
Ⅰ. 투과 전자현미경 ... 3
Ⅱ. 주사 전자현미경 ... 15
Ⅲ. X선 분석 ... 25
Ⅳ. 사진 처리 ... 26
제2장 시료 제작 기술
Ⅰ. 섀도잉(Shadowing) ... 27
A. 섀도잉을 해야 하는 시료 ... 27
B. 섀도잉법의 원리 ... 28
C. 섀도잉의 증착 조건과 증착 금속 ... 29
1. 증착에 필요한 조건 ... 29
2. 섀도잉의 각도와 시료의 높이 ... 29
3. 증착 금속의 선택 ... 30
D. 섀도잉의 실제 ... 30
1. 시료의 전처리 ... 30
2. 섀도잉의 증착법 ... 30
3. 각종 증착법 ... 31
E. 섀도잉의 해상도 ... 33
1. 해상도의 표시와 그 한계 ... 33
2. 섀도잉과 레플리카 ... 33
Ⅱ. 레플리카(Replica) ... 34
A. 레플리카의 목적과 원리 ... 34
1. 레플리카의 필요성 ... 34
2. 레플리카로부터 시료 상이 얻어지는 원리 ... 34
B. 레플리카의 종류와 특징 ... 35
1. 레플리카 제작법의 종류 ... 35
2. 레플리카의 각종 제작법의 특징 ... 36
C. 증착형 1단 레플리카의 제작 ... 37
1. 시료의 준비 ... 37
2. 레플리카 증착의 수기 ... 37
3. 레플리카막으로부터 시료의 용해 제거 ... 38
D. 레플리카상과 해상도 ... 39
1. 레플리카상의 해석 ... 39
2. 레플리카의 해상도 ... 39
Ⅲ. 네거티브 염색(Negative Stain) ... 40
1. 원리 ... 40
2. 장점과 단점 ... 40
3. 네거티브 염색액 ... 41
4. 염색액의 조제 ... 41
5. 염색의 실제 ... 42
6. 다른 전현 수기와 네거티브 염색법과의 병용 ... 45
Ⅳ. 초박절편(Ultrathin Section) ... 49
1. 초박절편법(Ultrathin Sectioning) ... 49
A. 시료의 채취 ... 49
B. 고정 ... 49
1. 고정액의 종류 ... 50
2. 고정시에 영향을 끼치는 인자 ... 52
3. 고정액의 처방 ... 53
4. 고정법 ... 54
5. 현재 사용 빈도가 잦은 완충액 ... 56
C. 탈수 ... 56
D. 포매 ... 57
1. 포매제 ... 58
2. 포매제의 조제 ... 58
3. 포매의 실제 ... 59
E. 박절 ... 61
1. 유리칼의 제작 ... 61
2. 다이아몬드칼 ... 63
3. 초박절기 ... 64
4. 박절의 실제 ... 64
F. 전자 염색 ... 73
1. 염색액 ... 73
2. 절편 염색법 ... 74
3. 블록 염색 ... 75
2. 동결 초박절편법(Ultrathin Freeze Sectioning Method) ... 76
A. 장치 ... 77
B. 박절 수기 ... 78
1. 시료 채취 ... 78
2. 고정 ... 79
3. 동결 ... 79
4. 초박절 ... 80
5. 재물 ... 81
6. 염색 ... 81
7. 검경 ... 82
C. 전현상의 판독법 ... 82
Ⅴ. 연속절편법(Serial Sectioning) ... 87
A. 연속절편의 계획 ... 87
1. 일반적 사항 ... 87
2. 대상의 설정 ... 88
3. 두께(깊이)의 설정 ... 88
B. 블록의 선정과 다듬기 ... 88
1. 다듬기의 모양 ... 88
2. 모서리의 마무리 ... 88
3. 측벽면의 마무리 ... 89
4. 메시와의 관계 ... 89
C. 메시의 준비와 처리 ... 89
1. 메시의 선정 ... 89
2. 포름바 지지막 제작 ... 90
3. 막 건져올리기(막붙이기) ... 90
D. 절편 재물의 실제 ... 91
1. 절편 재물에 앞서서의 주의 ... 91
2. 연속절편 리본의 작업과 취급 ... 91
3. 절편의 재물 ... 91
E. 염색 및 카본 증착상의 주의 ... 93
1. 일반적 주의 사항 ... 93
2. 염색 때의 주의 ... 93
3. 카본 증착 ... 93
F. 3차원 구조의 재구축 ... 93
1. 재구축법 ... 93
2. 트레이싱법 ... 93
3. 층판 재구축법 ... 94
Ⅵ. 동결 레플리카법(Freeze Replica Method) ... 98
A. 동결 레플리카법의 순서 ... 98
1. 동결할단법의 기술 실례 ... 98
B. 방법의 요령과 유의점 ... 100
1. 재료의 전처리 ... 100
2. 동결 ... 101
3. 할단 ... 102
4. 에칭 ... 102
5. 섀도잉 ... 103
6. 카본 보강 ... 104
7. 레플리카 회수 ... 104
8. 관찰 ... 104
C. 급속 동결법에 의한 동결 에칭법 ... 104
D. 인공 산물 ... 105
1. 전처리 ... 105
2. 동결 ... 105
3. 할단 ... 105
4. 증착 ... 105
5. 레플리카 회수 ... 105
Ⅶ. 주사 전자현미경 시료(Preparation of SEM Specimen) ... 106
A. 의·생물 재료의 특질과 시료 처리 ... 106
B. 일반 시료 기술 ... 107
1. 재료의 채취 ... 107
2. 세척(클리닝) ... 107
3. 고정 ... 108
4. 잘라내기 ... 109
5. 수세와 탈수 ... 109
6. 건조 ... 109
7. 재물 ... 110
8. 표면 전도 처리 ... 111
9. 전도 염색법 ... 112
C. 장기 및 조직의 시료를 만드는 방법 ... 112
1. 표면 관찰 시료 ... 112
2. 단면 관찰 시료 ... 113
D. 유리세포 시료를 만드는 방법 ... 113
제3장 응용(Application)
Ⅰ. 생검 및 부검 포르말린 고정 재료의 전자현미경적 응용 ... 114
A. 포르말린에 장기간 고정 보존된 재료로부터의 전현 시료의 제작 ... 114
1. 잘라내기 ... 114
2. 잘게 썰기(세절) ... 114
3. 수세 ... 115
4. 오스뮴산에 의한 후염색 ... 115
5. 탈수 ... 115
6. 포매 ... 115
B. 실례 ... 115
1. 과립근아세포종 ... 115
2. 봉와성 연부육종 ... 116
3. 평활근육종 ... 117
4. 헤르페스 바이러스 감염(간) ... 118
5. 전염성 연속종 ... 118
Ⅱ. 파라핀 포매 재료의 전자현미경적 응용 ... 120
A. 파라핀 포매 재료로부터의 시료 제작 ... 120
B. 실례 ... 120
1. 횡문근육종 ... 120
2. 형질세포종 ... 121
3. 헤르페스 바이러스 감염증(간) ... 124
4. 전염성 연속종 ... 124
Ⅲ. 파라핀 절편 병리조직 표본의 전자현미경적 응용 ... 125
A. 파라핀 절편표본으로부터의 시료 제작 ... 125
B. 실례 ... 126
Ⅳ. 후절 에폭시 수지절편의 광학현미경 관찰 ... 126
A. 절편붙이기 ... 126
B. 후절 에폭시 수지절편의 염색 ... 128
1. 염색의 일반적 기술 ... 128
2. 주된 염색법 ... 128
3. 탈수지법 ... 132
4. 절편으로부터 오스뮴산을 제거하는 방법 ... 134
Ⅴ. 에폭시 수지 이외의 후절 수지절편의 광학현미경 관찰 ... 135
A. 폴리에스테르 수지절편의 염색 ... 135
1. Thionin·azure·fuchsin 염색 ... 135
2. PAS 염색에 대한 thionin·azure 대비 염색 ... 135
B. 메타크릴 수지절편의 염색 ... 136
1. Jennings 등의 염색법 ... 136
2. Flax와 Caulfield가 이용한 염색법 ... 137
3. 일반 병리조직 검사에 메타크릴 수지절편을 사용한 Zambernard 등의 방법 ... 138
C. 수용성 메타크릴 수지절편의 염색 ... 138
Ⅵ. 인접절편에 의한 광학현미경상과 전자현미경상의 대응 ... 140
Ⅶ. 소위 블루 절편에 의한 전자현미경 저배율 관찰 ... 141
Ⅷ. 준초박절편의 광학현미경 및 전자현미경 2중 관찰 ... 143
Ⅸ. 중성 완충 포르말린의 효용성 ... 144
제4장 각종 재료의 취급 방법과 판독법
Ⅰ. 심장(Heart) ... 150
A. 시료 채취법 ... 150
B. 고정 및 고정액 ... 150
C. 정상 구조 ... 150
1. 심근세포 ... 150
2. 심내막 ... 151
3. 심외막 ... 151
D. 대사 장해 및 침착증 ... 151
1. 당원병과 당원축적증 ... 151
2. 호염기성 변성 ... 152
3. 그 밖의 당원 침착 ... 153
4. 점액다당증 ... 153
5. 지방 변성 ... 154
6. 리포푹신 ... 154
7. Fabry병 ... 154
8. Kearns-sayre 증후군 ... 154
9. 아밀로이드증 ... 155
10. 안트라사이클린계 항생물질에 의한 장해 ... 155
11. 응고괴사 ... 155
E. 심근비대 ... 157
1. 순수 비대 ... 157
2. 변성을 동반한 비대 ... 157
F. 특발성 심근증 ... 159
G. 심근허혈 ... 159
H. 염증 ... 160
1. 류머티스열 ... 160
2. 바이러스성 심근염 ... 162
I. 심내막 탄성 교원섬유증 ... 162
J. 종양 ... 162
1. 심점액종 ... 162
2. 심횡문근종 ... 162
Ⅱ. 혈관(Blood Vessel) ... 165
A. 고정시의 혈관 내압 ... 165
1. 허탈된 혈관과 신전된 혈관의 소견 차이 ... 165
2. 관류고정법의 실제 ... 166
B. 표본채취 부위의 선정 ... 167
1. 사람의 경우 ... 168
2. 동물의 경우 ... 170
C. 특수 전자 염색법 ... 171
1. periodic acid와 methenamine silver(PAM) 염색 ... 171
2. 루테늄 레드 염색 ... 172
3. 양이온 콜로이드 철 염색 ... 173
4. 탄성섬유 염색 ... 174
D. 동맥벽의 사후 변화 ... 174
1. 혈관 평활근세포 ... 174
2. 내피세포 ... 174
Ⅲ. 혈액세포(Blood Cell) ... 176
Ⅳ. 림프절(Lymph Node) ... 182
A. 시료의 취급법 ... 182
B. 림프절의 정상 구조 ... 182
1. 림프구 ... 184
2. 림프아구와 면역아구 ... 184
3. 배 중심 세포 ... 184
4. 형질세포 ... 185
5. 소위 '세망세포' ... 185
C. 림프절의 병적 상태 ... 190
1. 면역아구성 림프선증 ... 190
2. Hodgkin병 ... 197
3. (비Hodgkin) 악성 림프종 ... 197
Ⅴ. 비장(Spleen) ... 198
A. 비장의 전현 시료 기술 ... 198
1. 비장의 구조적 특수성과 시료 기술 ... 198
2. 비장의 관류고정 ... 198
3. 비장의 전현 관찰 기술 ... 199
B. 비장의 전현상 ... 200
1. 백비수와 여포 주변대 ... 201
2. 적비수 ... 202
Ⅵ. 하수체(Pituitary Gland) ... 206
1. 전현 관찰로 분명히 할 수 있는 하수체 병변 ... 206
2. 시료의 처리 방법 ... 206
3. 광현 소견과의 대비 ... 207
4. 사람의 비종양성 하수체 전엽세포의 미세 구조 ... 207
5. 하수체 선종 ... 211
6. 미세 구조와 증상 및 혈중 호르몬값과의 대비 ... 215
7. 내분비학적 데이터, 전현, 면역 염색을 병용한 하수체 선종의 새로운 분류 ... 215
Ⅶ. 갑상선(Thyroid Gland) ... 218
A. 갑상선염 ... 218
1. 아급성(비화농성) 갑상선염(de Quervain 갑상선염, 거세포성 갑상선염) ... 218
2. 하시모토 갑상선염 ... 220
B. 갑상선 종양 ... 223
1. 선종 ... 223
2. 유두(선)암 ... 223
3. 여포(선)암 ... 223
4. 미분화암 ... 228
5. 수양암 ... 228
C. 갑상선 기능 항진증 ... 230
1. Graves병 ... 230
2. Plummer병(중독성 선종) ... 230
Ⅷ. 부신(Adrenal Gland) ... 233
A. 부신의 적출과 고정 ... 233
B. 부신의 전현적 판독 ... 233
1. 정상 부신피질 ... 234
2. 정상 부신수질 ... 236
3. 부신선종(Cushing 증후군) ... 236
4. 갈색세포종 ... 239
Ⅸ. 흉선(Thymus) ... 240
A. 전현 시료 제작상의 주의 ... 240
1. 투과 전자현미경 ... 240
2. 주사 전자현미경 ... 241
3. 동결할단법 ... 241
4. 세포 표면 항원의 관찰 ... 241
5. 세포 내 항원의 관찰 ... 241
B. 흉선의 초미세 구조 ... 241
1. 기본 구조 ... 241
2. 상피세포 ... 242
3. 림프구 ... 245
4. 대식세포 및 수상세망세포 ... 245
5. 맥관류 ... 245
6. 흉선 림프 여포 ... 245
Ⅹ. 폐(Lungs) ... 246
A. 폐의 취급 방법 ... 246
1. 재료를 잘라 내는 방법 ... 246
2. 고정법 ... 246
B. 폐의 관찰법 ... 250
1. 초박절편의 투과 전자현미경상 ... 250
2. 동결할단 레플리카법에 의한 관찰 ... 254
3. 주사 전자현미경에 의한 관찰 ... 255
4. 폐표층 활성 물질 ... 255
XI. 치아(Teeth) ... 258
A. 절편인 경우의 취급 방법 ... 258
1. 고정 ... 258
2. 탈회 ... 259
3. 수세와 탈수 ... 261
4. 포매 ... 261
5. 중합 ... 262
6. 블록의 면내기와 그 정형 ... 263
7. 예비 관찰 ... 264
8. 초벌다듬기 ... 264
9. 박절과 재물 ... 265
10. 재물 후의 처리 ... 266
B. 표면 관찰 때의 취급 방법 ... 267
1. 레플리카법 ... 267
2. 동결할단법 ... 271
3. 주사 전현법 ... 272
XII. 위(Stomach) ... 276
A. 표본 제작에 관하여 ... 276
1. 고정 ... 276
2. 광학현미경용 염색 ... 276
B. 비암 위점막 ... 276
1. 위저선 주세포 ... 276
2. 점액 생산 세포군 ... 277
C. 위암 ... 278
1. 조기 위암과 경계 영역 병변 ... 278
2. 진행암 ... 281
XIII. 장(Intestine) ... 283
A. 고정 전의 준비 ... 283
1. 고정 전에 이용하는 기구 ... 283
2. 고정액의 제작 ... 283
B. 고정 ... 285
C. 탈수 ... 285
D. 포매 ... 285
E. 절편 제작 ... 286
1. 장조직의 오리엔테이션 및 블록의 정형 ... 286
2. 기술 ... 287
3. 광현용 절편 ... 287
F. 전현절편 ... 288
1. 전현절편 ... 288
2. 전자 염색 ... 288
G. 주의 사항 ... 291
H. 결론 ... 291
XIV. 간장(Liver) ... 292
A. 머리말 ... 292
B. 간의 정상 구조 ... 292
1. 간세포의 미세 구조 ... 292
2. 간유동 ... 295
3. 담관세포 ... 296
C. 간세포의 기본 병변과 그 판독 ... 296
1. 소포체의 변화 ... 296
2. 골지체의 변화 ... 297
3. 리소좀의 변화 ... 297
4. 미토콘드리아의 변화 ... 297
5. 세포질 기질의 변화 ... 298
6. 세포막의 변화 ... 299
7. 핵의 변화 ... 299
D. 인공 산물 ... 300
E. 결론 ... 300
XV. 신장(Kidney) ... 301
A. 머리말 ... 301
B. 정상인 사구체와 사구체 병변 ... 301
1, 정상인 사구체 ... 301
2. 미소 사구체 변화 ... 305
3. focal and segmental lesion(with only minor abnormalities in other glomeruli) ... 306
4. 막성 신염(막성 신증) ... 307
5. 메산지움 증식성 신염 ... 309
6. 관내 증식성 사구체 신염 ... 310
7. 막성 증식성 사구체 신염 ... 311
8. dense deposit glomerulonephritis(dense deposit disease)(membranoproliferative glomerulonephritis type Ⅱ) ... 313
9. 반월체 형성성(관외성) 신염 ... 314
10. 경화성 신염 ... 315
C. 신생검에 관한 몇 가지의 문제점 ... 315
1. 조직절편의 두께, 절편의 크기 ... 315
2. 신생검에 있어서 전현의 필요도 ... 316
3. 반복 신생검과 조직상의 개선, 진전 ... 317
D. 결론 ... 317
XVI. 정소(Testis) ... 318
1. 재료의 취급 방법 ... 318
2. 조정능 ... 319
3. 조정세포의 세포 동태 ... 321
4. 세프톨리 세포 ... 322
5. 정세관 고유막 ... 324
6. 라이지히 세포 ... 324
XVII. 여성 생식기(Female Reproductive Organ) ... 325
A. 산부인과 영역의 전현 재료 취급 ... 325
1. 시료 채취시의 주의 ... 325
2. 시료 제작상의 주의 ... 325
B. 산부인과 영역의 전현 사진의 판독 방법 ... 326
1. 주요 장기의 성주기에 따른 차이 ... 326
2. 여성 생식기의 대표적 종양 ... 332
C. 결론 ... 335
XVIII. 골(Bone) ... 337
A. 골조직의 취급 방법 ... 337
1. 시료 채취 ... 337
2. 고정·포매 ... 337
3. 탈회법 ... 337
4. 초박절편 제작 ... 338
B. 정상 골조직(골단연골판을 포함한)을 보는 방법 ... 338
1. 골단연골판 ... 338
2. 파골세포 ... 340
3. 골아세포 ... 341
4. 골세포 ... 341
5. 연골의 콜라겐과 골의 콜라겐 ... 341
C. 골종양 세포를 보는 방법 ... 342
1. 핵의 이형 ... 342
2. 핵소체의 변연화 ... 342
3. 핵내 과립 ... 342
4. 핵내 봉입체 ... 342
5. paired cisternae ... 342
6. long spacing collagen(LSC) ... 342
7. Ewing 육종 ... 342
8. 비Hodgkin형 악성 림프종 ... 342
9. 골거세포종 및 동맥유양 골낭종에서 보는 다핵거세포 ... 351
10. 랑게르한스 세포 과립 ... 351
XIX. 근육(Muscle) ... 353
머리말 ... 353
A. 환자의 선택 ... 353
B. 피생검근의 선정 ... 354
C. 검체의 채취 방법과 처치 ... 355
D. 고정 및 그 후의 처치 ... 356
1. 글루타르알데히드·오스뮴산 2중 고정법 ... 356
2. 글루타르알데히드 고정법 ... 357
3. 전자 염색 ... 357
E. 전자현미경학적 관찰의 실제 ... 357
XX. 결합조직(Connective Tissue) ... 361
A. 조직의 채취와 고정 ... 361
B. 탈수 ... 361
C. 포매 ... 361
D. 박절 ... 362
E. 전자 염색 ... 362
1. 우라닐-레드 2중 염색 ... 362
2. 타닌산 염색 ... 363
F. 루테늄 레드(ruthenium red, RR) 염색 ... 364
1. 용액의 조제 ... 364
2. 표본의 제작 ... 365
3. 시료 제작상의 주의 사항 ... 365
4. 소견 ... 365
G. 효소 소화 시험 ... 366
1. 배당 단백질 및 당단백 ... 366
2. 교원섬유 ... 367
3. 탄성섬유 ... 368
XXI. 중추신경계(Central Nervous System) ... 369
A. 머리말 ... 369
B. 관류법 ... 369
C. 신경원 ... 370
D. 수초 ... 372
E. 교세포 ... 373
F. 슈반세포 ... 373
XXII. 피부(Skin) ... 375
A. 머리말 ... 375
B. 표본 제작상의 유의점 ... 375
C. 피부 전현 관찰의 기초 지식 ... 376
1. 표피 ... 376
XXIII. 종양(Neoplasia) ... 388
A. 머리말 ... 388
B. 종양의 채취에서 포매까지 ... 388
C. 관찰법 ... 389
1. 0.5∼1.0㎛ 절편 관찰의 필요성 ... 389
2. 종양세포의 배열과 세포 표면 및 접착 양식 ... 389
3. 세포 내 소기관 및 봉입체 ... 391
D. 종양의 조직형별 특징 ... 403
1. 암 ... 403
2. 골·연부조직 종양 ... 406
3. 신경계 종양 ... 408
4. 악성 림프종 ... 410
E. 결론 ... 414
제5장 좋은 사진과 나쁜 사진
Ⅰ. 좋은 TEM 사진과 나쁜 TEM 사진 ... 418
A. 고정에서 포매까지에 생기기 쉬운 인공 산물 ... 418
1. 세포막의 단열 ... 418
2. 미토콘드리아의 부분적인 팽화, 파열과 미엘린양 구조의 형성 ... 419
3. 세포 기질의 유실 ... 421
B. 염색 불량의 원인 ... 421
C. 가속 전압의 선택 ... 424
D. 비점수차의 수정 ... 424
E. 시료 드리프트 ... 424
F. 초점맞추기와 해상도 ... 427
G. 전자선 조사에 의한 콘태미네이션의 영향 ... 427
Ⅱ. 좋은 SEM 사진과 나쁜 SEM 사진 ... 433
A. 시료 형태의 보존 ... 433
1. 침투압의 영향 ... 433
2. 관류압 변동의 영향 ... 433
B. 관찰면의 노출 ... 434
1. 시료면 피복물의 세척 제거와 혈관 관류 세척 ... 434
2. 유리세포 시료의 분산 ... 434
C. 적당한 전도 처리 ... 438
1. 전도 코팅의 과소 ... 438
2. 전도 코팅의 과다 ... 438
3. 이온 에칭에 의한 시료 손상 ... 439
D. 해상도와 상질 ... 440
1. 비점수차의 영향 ... 440
2. 가속 전압의 선택 ... 440
3. 시료 조사 전류의 다소 ... 440
E. 초점 심도의 고려 ... 445
F. 전자선 조사에 의한 콘태미네이션 ... 445
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