목차 일부
제1장 캘러스와 세포현탁배양의 분리 및 유지 ... 1
1. 머리말 ... 1
2. 실험실의 일반 요건 ... 1
3. 배지 ... 3
3.1 배지 성분 ... 3
3.2 배지 제조 ... 7
3.3 배지의 선택 ... 10
4. 캘러스 배양 ... 12
4.1 절편의 선택 ... 12
4.2 절편의 제조와 살균 ... 12
4...
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제1장 캘러스와 세포현탁배양의 분리 및 유지 ... 1
1. 머리말 ... 1
2. 실험실의 일반 요건 ... 1
3. 배지 ... 3
3.1 배지 성분 ... 3
3.2 배지 제조 ... 7
3.3 배지의 선택 ... 10
4. 캘러스 배양 ... 12
4.1 절편의 선택 ... 12
4.2 절편의 제조와 살균 ... 12
4.3 캘러스의 유도, 계대배양 및 유지 ... 14
5. 현탁배양 ... 16
5.1 캘러스에서 현탁배양의 형성 ... 16
5.2 엽육세포 현탁의 분리 ... 17
5.3 계대배양과 성장측정 ... 17
인용문헌 ... 23
제2장 반수체 세포의 배양 ... 25
1. 머리말 ... 25
2. 약과 화분의 배양 ... 26
2.1 약배양 ... 26
2.2 화분배양 ... 37
2.3 배양 식물체 ... 38
2.4 돌연변이체의 기내선발 ... 41
3. 맺음말 ... 42
인용문헌 ... 42
제3장 식물 원형질체의 분리, 배양 및 유전적 조작 ... 45
1. 머리말 ... 45
2. 원형질체 분리를 위한 식물체와 세포의 조건 ... 45
2.1 식물체의 성장 ... 45
2.2 병충해 방제 ... 46
2.3 세포현탁의 성장 ... 46
2.4 묘의 성장 ... 46
3. 원형질체 분리방법 ... 47
3.1 잎 원형질체 ... 47
3.2 배양된 세포 원형질체 ... 47
3.3 자엽 원형질체 ... 50
3.4 뿌리 원형질체 ... 51
3.5 하배축, 줄기 및 잎자루 원형질체 ... 51
3.6 꽃잎 원형질체 ... 51
3.7 화분립과 4분자 원형질체 ... 52
3.8 야생형과 무균배양에서 나온 백화(albino)의 잎 원형질체 ... 53
3.9 껍질을 벗길 수 없는 잎의 원형질체 ... 53
4. 원형질체 배양 ... 54
4.1 원형질체의 계산 ... 54
4.2 원형질체의 생존력(FDA염색) ... 54
4.3 한천에 평판배양 ... 55
4.4 현적배양 ... 55
4.5 한천 위에 액체배지 배양 ... 55
4.6 아가로스 배지 배양 ... 56
5. 원형질체 배양의 유지와 식물체 재생 ... 56
5.1 원형질체의 분열 ... 57
5.2 식물체 재생 ... 57
5.3 원형질체 배양과 재생용 배지 ... 57
5.4 원형질체의 배양조건 ... 58
6. 식물의 체세포 잡종 ... 60
6.1 서언 ... 60
6.2 원형질체 융합 - 일반과정 ... 61
6.3 융합처리 - Polyethylene Glycol(PEG) 융합 ... 62
6.4 융합처리 - 높은 pH와 Ca^{2+} 융합 ... 63
6.5 소규모 융합 ... 64
6.6 전기융합(electrofusion) ... 65
7. 체세포 잡종 식물체의 선발 ... 66
7.1 서언 ... 66
7.2 핵 백화 돌연변이체의 형성 ... 66
7.3 백화 돌연변이체의 자발적 형성 ... 67
7.4 단일 이핵접합체의 분리 ... 70
7.5 체세포 잡종 식물체의 분석 ... 70
8. 원형질체 조작을 통한 식물체의 형질전환 ... 71
8.1 서언 ... 71
8.2 분리된 Ti plasmid에 의한 형질전환 ... 71
8.3 Agrobacterium에 의한 재생 원형질체의 형질전환 ... 72
8.4 형질전환과 종양형성의 확인 ... 73
9. 원형질체에 의한 세포기관의 흡수 ... 74
9.1 서언 ... 74
9.2 조류, 엽록체 및 미생물의 흡수 ... 74
10. 제조자와 공급자 ... 75
인용문헌 ... 78
제4장 유용한 특성을 가진 식물세포의 선발 : 억제물질 저항성 ... 81
1. 머리말 ... 81
2. 현탁배양에서의 선발 ... 81
2.1 현탁세포의 제조 ... 82
2.2 억제물질의 농도 ... 83
2.3 돌연변이 유발 ... 86
2.4 1단계 선발(single-step selection) ... 87
2.5 다단계 선발(multi-step selection) ... 87
2.6 한천고체배지에서의 선발 ... 88
3. 원형질체 배양에서의 선발 ... 89
4. 캘러스 배양에서의 선발 ... 90
5. 억제물질 저항성 세포계통의 안정성과 영양계 형성 ... 91
5.1 저항성의 안정성 ... 91
5.2 세포응집체의 배양에 의한 영양계 형성 ... 92
5.3 원형질체 배양에 의한 영양계 형성 ... 92
5.4 단일세포배양에 의한 영양계 형성 ... 93
인용문헌 ... 94
제5장 배형성, 기관형성 및 식물체 재생 ... 95
1. 머리말 ... 95
1.1 식물체 재생의 방식 ... 96
1.2 절편의 요소 ... 98
1.3 배지의 요소 ... 100
1.4 배양환경 ... 107
2. 체세포 배형성 ... 108
2.1 간접적인 체세포 배형성 ... 109
2.2 직접적인 무성 배형성 ... 112
3. 기관형성 ... 114
3.1 캘러스에서 부정싹의 출현 ... 115
3.2 배양 절편에서 직접 식물체의 재생 ... 116
3.3 기내에서의 액지 발생 ... 117
4. 원형질체에서의 식물체 재생 ... 119
4.1 담배의 원형질체 분리와 식물체 재생방법 ... 119
5. 식물체 재생 : 현상, 문제, 가능성 ... 120
6. 맺음말 ... 122
인용문헌 ... 123
제6장 조직배양을 이용한 도관분화의 연구 ... 125
1. 머리말 ... 125
2. 조직배양의 이용에 관한 일반적인 고찰 ... 126
3. 연구계획 ... 127
4. 연구방식 ... 128
4.1 분리된 세포의 이용 ... 130
4.2 절편의 이용 ... 131
4.3 캘러스 배양의 이용 ... 133
4.4 현탁배양 ... 134
5. 식물 생장조절제의 행동과 대분자의 합성 ... 135
6. 도관분화를 위한 생화학적 표지물 ... 138
6.1 2차세포막 형성 ... 140
7. 맺음말 ... 145
인용문헌 ... 146
제7장 세포현탁배양에 의한 2차생성물의 형성 ... 149
1. 머리말 ... 149
2. 2차생성물의 합성에 포함된 계획 ... 150
2.1 2차생성물의 합성을 위한 배지 ... 151
2.2 배양의 환경조건 ... 153
2.3 C. roseus의 현탹배양에서 사문석 생산을 위한 2단계 방법 ... 154
2.4 C. roseus의 현탹배양에서 사문석 생산을 위한 1단계 방법 ... 155
2.5 잇따른 계대배양에 의한 생성물 형성의 불안정 ... 157
3. 생성물의 분석 ... 157
3.1 시료 추출 ... 157
3.2 시료조작과 예비분별 ... 160
3.3 분리와 정량 ... 162
3.4 면역학적 검정 ... 168
3.5 생성물의 확인 ... 169
4. 대규모 배양 ... 169
4.1 대규모 배양과 관련된 문제 ... 170
4.2 현존하는 생물반응기의 변경 ... 172
4.3 생물반응기의 구조 ... 173
4.4 상업적으로 이용할 수 있는 생물반응기 ... 177
4.5 대규모 배양에서 2차생성물의 형성 ... 177
4.6 연속배양 ... 177
5. 부동화세포 ... 178
5.1 식물세포에 응용할 수 있는 부동화방법 ... 179
5.2 부동화세포의 특성과 문제점 ... 183
5.3 부동화세포 반응기 ... 185
6. 생체내 변화 ... 187
6.1 디기탈리스 스테로이드 배당체(digitalis steroid glycoside)의 생체내 변화 ... 190
인용문헌 ... 194
제8장 냉동보존과 생식질의 저장 ... 197
1. 머리말 ... 197
2. 기본 저장기술 ... 197
2.1 완만성장 ... 198
2.2 냉동보존 ... 198
2.3 저장계획 ... 200
3. 장치 ... 201
3.1 완만성장용 장치 ... 201
3.2 냉동보존용 장치 ... 202
4. 저장방법 - 완만성장 ... 205
4.1 일반 고려사항 ... 205
4.2 저온에서의 생육 ... 205
4.3 삼투 억제제 첨가배지에서의 생육 ... 206
4.4 생장조절제 첨가배지에서의 생육 ... 206
4.5 제한요인의 결합 ... 207
5. 저장방법 - 냉동보존 ... 207
5.1 세포현탁배양의 보존 ... 208
5.2 원형질체의 보존 ... 210
5.3 캘러스의 보존 ... 210
5.4 배의 보존 ... 211
5.5 약과 화분배의 보존 ... 212
5.6 경단의 보존 ... 212
6. 저장에 있어 성공의 평가 ... 214
6.1 완만성장의 재료 ... 214
6.2 냉동보존된 재료 ... 214
7. 맺음말 : 과학과 농업의 주요자원으로서의 기내 식물 생식질 ... 221
7.1 배양의 이동 ... 221
7.2 특성화와 평가 ... 221
7.3 정보의 출처 ... 222
인용문헌 ... 222
제9장 조직배양의 식물병리학적 이용 ... 225
I - 바이러스 ... 225
1. 머리말 ... 225
2. 원형질체에서의 바이러스의 증식 ... 226
2.1 원형질체 제조 ... 226
2.2 원형질체에 바이러스 접종 ... 227
2.3 원형질체에 바이러스 핵산 접종 ... 232
2.4 바이러스의 축적, 항원 및 핵산의 평가 ... 235
2.5 저항성 연구에 응용 ... 246
3. 캘러스에서 유래된 배양의 이용 ... 248
인용문헌 ... 250
제10장 조직배양의 식물병리학적 이용 ... 251
II - 균류 ... 251
1. 머리말 ... 251
2. 이중배양 - 사체영양성 병원체 ... 251
2.1 앨팰퍼와 Phytophthora megasperma ... 253
2.2 담배와 Phytophthora parasitica var. nicotianae ... 258
3. 이중배양 - 절대 기생영양성 병원체 ... 261
3.1 사탕수수와 Sclerospora sacchari ... 262
3.2 담배와 Peronospora tabacina ... 264
인용문헌 ... 266
국문색인 ... 267
영문색인 ... 269
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